蜂王人工授精技術是一種借助器械給蜂王進行人工配種的技術，運用此項技術不但可以準確無誤地使處 女王和選定的雄蜂交配，而且還可進行在自然狀態下根本不可能發生的交配行為，如母子回交、父女回交、單雄授精等。蜜蜂人工授精技術廣泛用于原種保純繁育，培育近交系，雜交制種以及品種的提純復壯等方面。
一、雄蜂和處 女王的選擇
雄蜂的質量關系著授精后蜂王的質量，與發育充分，體質健壯，無病害等優質雄蜂受精后，蜂王不但開產的時間早，而且產卵旺盛，維持正常產卵的時間也長。捕捉雄蜂的時間最好在中午12時之后至15時之前，在蜂群的巢門口選參加婚飛歸巢的雄蜂。性成熟的雄蜂行動敏捷，進巢迅速，因此，須在巢門口設置隔雄柵等障礙，才易于捕捉，凡腹部堅實又較小的，多數是性成熟雄蜂。腹部松軟的，較大的，多未成熟。婚飛歸巢的雄蜂興奮度較高，捕捉時若指力過大或受到壓擠，其體內陽莖則立即外翻并******，所以要注意輕拿輕放。
授精前要對處 女王進行選擇，一般是以個體大，腹部碩長，行動穩健活潑的處 女王為佳。適宜處 女王授精最佳時期為10～13日齡，也就是說處 女王出房后10～13日。如果授精過早，由于處 女王未到性成熟期，雖然已經授精，但精 子轉移到蜂王貯精囊的速度較慢，精 液在蜂王輸卵管內滯留時間較長，授精蜂王遲遲不能產卵，有的精 液在蜂王輸卵管內變質導致蜂王死亡。若授精過晚，處 女王在核群及框式王籠內時間過長，影響核群及框式王籠的使用效率。
二、儀器設備及消毒滅菌方法
主要儀器設備有實驗臺、藥品柜、蒸餾水器、體視顯微鏡（工作距離100毫米左右）、生物顯微鏡（1600×）、蜂王人工授精儀、微量注射器、高壓滅菌鍋、雄蜂籠、酒精燈、電爐、二氧化碳鋼瓶、膠管、常用玻璃器皿、注射器及日常用品。
實驗室地面用5%來蘇兒噴灑消毒；實驗室空間則用紫外線燈滅菌15分鐘。實驗臺面用75% 酒精擦拭。耐高溫的授精器械和附件用高壓滅菌鍋滅菌15～20分鐘，不耐高溫的器械用75%的酒精擦拭或灌洗滅菌。塑料注射針頭等用酒精消毒滅菌后，再用無菌蒸餾水加壓沖洗5～6遍。
三、采集雄蜂精 液及注意事項
采集雄蜂精 液前先強迫排精。當一切準備工作就緒時，在飛翔籠中捉出飛翔有力，腹部較堅實的雄蜂，通過手向腹部尾端施加壓力，使腹腔的血淋巴擠壓內陽莖，迫使陽莖漸次外翻。當陽莖球末端冒出淡黃褐色精 液時，停止擠壓。在加壓時用力要穩妥，切勿操之過急，如用力過大，容易導致精 液飛濺或陽莖球破裂。同時還要注意不要讓外翻的陽莖球及精 液接觸到雄蜂體表面及操作者的手指，以及造成污染。隨即用微量采精器采集球面上的精 液。首先將采精器吸入一小段空氣，使稀釋液與精 液有氣泡相隔，以免精 液混入大量稀釋液。但吸入的氣泡不能太大，如果吸入空氣較大，在采集精 液或以后授精過程中受到阻力時；空氣會膨脹和壓縮變形，給采集精 液或授精帶來不便，采集精 液時，針尖要貼緊精 液的表面，但又不能過深，以免將黏液吸入。采集完第一只后，再采集下一只雄蜂精 液時，將前一只雄蜂精 液推出針尖外一少部分，使其與準備采集的精 液面相接觸，這樣既可防止吸入空氣，又可減少吸入黏液的機會。一旦發現吸入黏液要盡快排出，哪怕是稀黏液也不可以混入精 液吸入針頭內。因為黏液不僅會堵塞針頭，如注射到蜂王側輸卵管后會凝固而堵塞輸卵管，這樣不僅影響精 子進入貯精囊，而且還會造成蜂王死亡。采集精 液結束時，針頭內仍然要吸入一段空氣，再用稀釋液封口，以免針口因精 液凝固而堵塞。
四、授精及操作要求
授精要求進針角度合適，部位準確。生殖道無損傷，操作過程無污染，授精量足，操作速度快。
首先把裝有處 女王的麻醉室固定在授精儀的麻醉室固定夾上，并調節工作距離，同時移動授精儀（或顯微鏡）使處 女王的腹部呈現在視野中央，調節至清晰為止。待處 女王通過麻醉進入昏迷狀態時，移動授精儀的背、腹鉤操縱桿，打開交配腔。這時，將背鉤伸到蜂王螫針鞘基部，并讓它嵌入基部的三角縫內。背鉤嵌入后，再一次調整背、腹鉤，把背腹板的距離拉開。此時即可看到交配腔中央靠近螫針鞘基部有一皺褶開口，該開口就是******口，移動注射器，排去針頭前端的保護液及氣泡，繼而施動縱向導軌使針尖接近******口，將******探針插入******，壓住******瓣突，使******口擴張。再調節縱向導軌使針尖沿著探針的背部徐徐進入******，直至中輸卵管，取出探針。當進針深度達1.8毫米時，略感到受到阻力后停止進針，然后將針頭稍退出一點，開始注****** 液。一次性授精通常注射8微升；二次性授精每次各注射4～5微升精 液。第一次與第二次授精間隔時間為24～48小時。注精完畢，稍待10～15秒后退出針頭，卸下麻醉室，小心退出蜂王，給蜂王作上標記，待蘇醒后送回原核群。
五、授精蜂王的管理
授精蜂王的管理，是指授精后至開始產卵這段時間的管理。蜂王人工授精是人工操縱器械完成的，蜂王沒有經過婚飛，雖然進行了授精，但是人工授精后的蜂王仍然會飛出巢外進行自然交尾活動。因此，必須采取相應的管理措施，防止蜂王再次自然交尾。目前控制人工授精蜂王出巢再交尾，多數是采取在小核群的巢門口安裝隔王珊或脫粉片的方法，控制蜂王飛出巢外。