蜜蜂人工授精技術在原種保純雜交制種乃至工程育種中起著重要的作用。

在人工授精前，首先選好雄蜂，強迫排精，采集精液，選擇好處女王，然后進行人工授精。將蜂王麻醉后，調整顯微鏡，在鏡下移動背腹鉤操縱桿，使背腹鉤在控針配合下，分別勾住背腹板頂端的中央位置，并向外側拉動背腹板，使其間距為3毫米至4毫米，然后再移動背鉤，使其膨大部分嵌入到鰲針腔基部的三角縫內，再拉動背腹鉤，把背腹板間距拉至5毫米至6毫米。鰲針腔打開后，調整蜂王和針頭的角度，排除針頭尖中的生理液和氣泡后，使針尖接近陰道口，用控針壓住瓣突，將針尖徐徐推進陰道，直至中部輸卵管，取出控針，將精液慢慢注入。一次性授精一般注入8微升精液；多次性授精每次各注射4微升至5微升精液，其間隔24小時至48小時。授精完畢，10秒至15秒后退出針頭，取出蜂王，點上標記，待其復蘇后，送回核心群或框式王籠暫時貯存。

受精蜂王要嚴加管理，使其得到工蜂的飼喂，保證受精蜂王所在蜂群的蜂數，以便調節巢溫，將蜂王剪翅或幽閉巢門，防止蜂王外出。